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PH范圍色譜柱基本要求和選擇活動要點

更新日期：2018-04-25 信息來源：本站瀏覽次數(shù)：3429

PH范圍色譜柱基本要求

①與固定相不互溶，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

②對樣品有適宜的溶解度，要求k值在可用范圍。溶解度太大，k值太小，不利于分離；溶解度太小，k值太大，可能使樣品在活動相中產(chǎn)生沉淀。

③必須與檢測器相適應(yīng)。例如用紫外檢測器，活動相本身在檢測波優(yōu)點應(yīng)無吸收。

④活動相的粘度要小，可以降低色譜柱的阻力而進(jìn)步柱效。

⑤純度高，不含機械雜質(zhì)。

PH范圍色譜柱選擇活動時需要考慮

①活動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時碰到某些有機相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性活動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性活動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

②純度。色譜柱的壽命與大量活動相通過有關(guān)，特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。

③必須與檢測器匹配。使用UV檢測器時，所用活動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收，或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時，應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作活動相，以進(jìn)步靈敏度。

④粘度要低

⑤對樣品的溶解度要適宜。假如溶解度欠佳，樣品會在柱頭沉淀，不但影響了純化分離，且會使柱子惡化。

⑥樣品易于回收。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。

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